一、 什么是硝酸纤维素膜
硝酸纤维素膜(NC膜)是胶体金法抗体检测试剂盒的核心耗材,也是检测结果呈现的载体。
硝化纤维膜是蛋白质印迹较为广泛使用的转移介质。它对蛋白质有很强的结合能力,适用于各种显色方法,包括同位素、化学发光(Lumino-1)、常规显色、染色和荧光显色;低背景和高信噪比。
NC膜的使用也非常简单,比如不需要甲醛预处理,只要在无离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了,比如NC膜很容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。
二、注意事项
选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择02um的,如果小于7KD的话可选择0.1um的膜。
还要注意选择纯的NC膜--混有含醋酸纤维的NC膜结合力会有所降低。选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择02um的,如果小于7KD的话可选择0.lum的膜。
三、影响蛋白质吸附的因素
1.溶解捕获蛋白的工作缓冲液;
2.用来固着捕获蛋白的NC膜;
3.捕获蛋白自身;
4.将捕获蛋白点样于NC膜的系统;
5.捕获蛋白点样时的环境湿度。
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