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关于定氮仪的详解
发布日期: 2022/10/29 10:12:46

定氮仪主要用来检测样品中的氨氮、蛋白质氮等含量。在食品、农业、药物等领域有着广泛的应用,是实验室比较重要的理化分析仪器之一。
“定氮仪”的应用
定氮仪的应用领域非常广,适用于粮油检测、饲料分析、植物养分测试、土肥检测、环保、医药、化工等行业的分析、教学及研究中主要用来检测粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、土壤、水、药物、沉淀物和化学品等中的氨氮、蛋白质氮等含量,是操作人员的理想工具,同时利用定氮仪也可以测二氧化硫等物质。因此可以说定氮仪是实验室比较重要的理化分析仪器之一。
而且随着科技的发展,定氮仪的技术水平也在不断提高,以全自动定氮仪为代表的智能化科技产品,在实际应用中,会更加轻松、便捷、安全,大大提高了试验的效率、效果的同时,也有效提高了仪器的安全性,保证了试验安全和操作人员的安全。
另外,定氮仪与农业的关系也非常密切,该仪器被广泛应用于食品、农作物、种子、土壤、肥料等样品的含氮量或蛋白质含量分析,在保障食品安全和提高农业生产效益方面,做出了重要的贡献。
“定氮仪”的分类及原理
定氮仪的分类
定氮仪常用的有两种:
1、凯氏定氮仪
2、杜马斯定氮仪
这二者的原理不同。
凯氏定氮仪
原理是凯氏定氮法
蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,蛋白质含量。含氮量×6.25=蛋白含量。有机物中的胺根在强热和CuSO4、浓H2SO4作用下,硝化生成(NH4)2SO4。
1、凯氏定氮法反应式为:
2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 (其中CuSO4做催化剂)
2、在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏释放出NH3 ,收集于H3BO3溶液中反应式为:
(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4
2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O
3、用已知浓度的H2SO4(或HCI)标准溶液滴定,根据HCI消耗的量计算出氮的含量,然后乘以相应的换算因子,既得蛋白质的含量反应式为:
(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3
(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3
杜马斯定氮仪
原理是杜马斯燃烧法
杜马斯燃烧的方法是将一定量的样品封装在铝舟中,然后在高温炉中进行燃烧;在催化剂和氧气的环境中,样品燃烧后生成的气体为:CO2、H2O、NOx;这些气体再经过还原炉后,NOx被还原为N2,而CO2和H2O分离开;最后氮元素被热传导检测器(TCD)来测量出含量。全部测量过程在3分钟内完成。
“定氮仪”的使用
以某品牌定氮仪为例
消化
1、准备6个凯氏烧瓶,标号。1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL,样品要加到烧瓶底部,切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g,浓硫酸2.0mL,30%过氧化氢1.0mL。4、5、6号烧瓶作为空白对照,用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质,对样品测定进行校正。4、5、6号烧瓶中加入蒸馏水1.0mL代替样液,其余所加试剂与1、2、3号烧瓶相同。
2、将加好试剂的各烧瓶放置消化架上,接好抽气装置。先用微火加热煮沸,此时烧瓶内物质炭化变黑,并产生大量泡沫,务必注意防止气泡冲出管口。待泡沫消失停止产生后,加大火力,保持瓶内液体微沸,至溶液澄清后,再继续加热使消化液微沸15min。在消化过程中要随时转动烧瓶,以使内壁粘着物质均能流入底部,以保证样品完全消化。消化时放出的气体内含SO2,具有强烈刺激性,因此自始自终应打开抽水泵将气体抽入自来水排出。整个消化过程均应在通风橱中进行。消化完全后,关闭火焰,使烧瓶冷却至室温。
蒸馏吸收
蒸馏和吸收是在微量凯氏定氮仪内进行的。凯氏定氮蒸馏装置种类甚多,大体上都由蒸气发生、氨的蒸馏和氨的吸收三部分组成。
1、仪器的洗涤
仪器安装前,各部件需经一般方法洗涤干净,所用橡皮管、塞须浸在10%NaOH溶液中,煮约10min,水洗、水煮10min,再水洗数次,然后安装并固定在一只铁架台上。仪器使用前,微量全部管道都须经水蒸气洗涤,以除去管道内可能残留的氨,正在使用的仪器,每次测样前,蒸气洗涤5min即可。较长时间未使用的仪器,重复蒸气洗涤,不得少于三次,并检查仪器是否正常。仔细检查各个连接处,保证不漏气。首先在蒸气发生器中加约2/3体积蒸馏水,加入数滴硫酸使其保持酸性,以避免水中的氨被蒸出而影响结果,并放入少许沸石(或毛细管等),以防爆沸。沿小玻杯壁加入蒸馏水约20mL让水经插管流入反应室,但玻杯内的水不要放光,塞上棒状玻塞,保持水封,防止漏气。蒸气发生后,立即关闭废液排放管上的开关,使蒸气只能进入反应室,导致反应室内的水迅速沸腾,蒸出蒸气由反应室上端口通过定氮球进入冷凝管冷却,在冷凝管下端放置一个锥形瓶接收冷凝水。从定氮球发烫开始计时,连续蒸煮5min,然后移开煤气灯。冲洗完毕,夹紧蒸气发生器与收集器之间的连接橡胶管,由于气体冷却压力降低,反应室内废液自动抽到反应室外壳中,打开废液排出口夹子放出废液。如此清洗2~3次,再在冷凝管下换放一个盛有硼酸-指示剂混合液的锥形瓶使冷凝管下口完全浸没在溶液中,蒸馏1~2min,观察锥形瓶内的溶液是否变色。如不变色,表示蒸馏装置内部已洗干净。移去锥形瓶,再蒸馏1~2min,用蒸馏水冲洗冷凝器下口,关闭煤气灯,仪器即可供测样品使用。
2、无机氮标准样品的蒸馏吸收
由于定氮操作繁琐,为了熟悉蒸馏和滴定的操作技术,初学者宜先用无机氮标准样品进行反复练习,再进行有机氮未知样品的测定。常用巳知浓度的标准硫酸铵测试三次。取洁净的100mL锥形瓶五只,依次加入2%硼酸溶液20mL,次甲基蓝-甲基红混合指示剂(呈紫红色)3~4滴,盖好瓶口待用。取其中一只锥形瓶承接在冷凝管下端,并使冷凝管的出口浸没在溶液中。注意:在此操作之前必须先打开收集器活塞,以免锥形瓶内液体倒吸。准确吸取2mL硫酸铵标准液加到玻杯中,小心提起棒状玻塞使硫酸铵溶液慢慢流入蒸馏瓶中,用少量蒸馏水冲洗小玻杯3次,一并放人蒸馏瓶中。然后用量筒向小玻杯中加入10 mL 30%NaOH溶液,使碱液慢慢流入蒸馏瓶中,在碱液尚未完全流入时,将棒状玻塞盖紧。向小玻杯中加约5mL蒸馏水,再慢慢打开玻塞,使一半水流入蒸馏瓶,一半留在小玻杯中作水封。关闭收集器活塞,加热蒸气发生器,进行蒸馏。锥形瓶中的硼酸-指示剂混合液由于吸收了氨,由紫红色变成绿色。自变色时起,再蒸馏3~5min,移动锥形瓶使瓶内液面离开冷凝管下口约lcm,并用少量蒸馏水冲洗冷凝管下口,再继续蒸馏1min,移开锥形瓶,盖好,准备滴定。在一次蒸馏完毕后,移去煤气灯,夹紧蒸气发生器与收集器间的橡胶管,排除反应完毕的废液,用水冲洗小玻杯几次,并将废液排除。如此反复冲洗干净后,即可进行下一个样品的蒸馏。按以上方法用标准硫酸铵再做两次。另取2mL蒸馏水代替标准硫酸铵进行空白测定二次。将各次蒸馏的锥形瓶一起滴定。
3、未知样品及空白的蒸馏吸收
将消化好的蛋白样品三支,空白对照液三支,依次作蒸馏吸收。加5mL热的蒸馏水至消化好的样品或空白对照液中,通过小玻杯加到反应室中,再用热蒸馏水洗涤小玻杯3次,每次用水量约3mL,洗涤液一并倒入反应室内。其余操作按标准硫酸铵的蒸馏进行。由于消化液内硫酸钾浓度高而呈粘稠状,不易从凯氏烧瓶内倒出,必须加入热蒸馏水5 mL稀释之,如果有结晶析出,必须微热溶解,趁热加入玻杯,使其流入反应室。此外,还应当注意趁仪器洗涤尚未完全冷却时立即加入样品或空白对照液,否则消化液通过冷却的管道容易析出结晶,造成堵塞。
滴定
样品和空白蒸馏完毕后,一起进行滴定。打开接受瓶盖,用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的标准盐酸溶液进行滴定。待滴至瓶内溶液呈暗灰色时,用蒸馏水将锥形瓶内壁四周淋洗一次。若振摇后复现绿色,应再小心滴入标准盐酸溶液半滴,振摇观察瓶内溶液颜色变化,暗灰色在一二分钟内不变,当视为到达滴定终点。若呈粉红色,表明已超越滴定终点,可在已滴定耗用的标准盐酸溶液用量中减去0.02mL,每组样品的定氮终点颜色必须完全一致。空白对照液接受瓶内的溶液颜色不变或略有变化尚未出现绿色,可以不滴定。记录每次滴定耗用标准盐酸溶液毫升数,供计算用。
“定氮仪”的常见问题
以某品牌定氮仪为例
1、 凯氏定氮仪在蒸馏时翻滚剧烈,会对操作者构成危险吗?
答:一般不会,凯氏定氮仪在蒸馏时翻滚剧烈,是水蒸气大量进入消化管液体翻滚,并非剧烈反应造成;而且仪器有超压保护装置,可以保持管路内部常压,避免危险。
2、 凯氏定氮仪工作中对水质有什么要求?
答:凯氏定氮仪的蒸馏水桶内要装蒸馏水或纯水,机器长期不用要将蒸馏器里水放掉。
3、 凯氏定氮仪开机没声音是怎么回事?
答:凯氏定氮仪开机没声音,如果机器电源开关内红灯亮,说明是定氮仪内保险管烧断了,保险管位置在机器内部靠近电源开关接口5公分处黑色壳子内。
4、 凯氏定氮仪开机后蒸馏器内不加水怎么解决?
答:开机半分钟后检查蒸馏水桶是否漏气,能被气充鼓是正常;检查蒸馏水桶内水位是否超过三分之一,不够补齐;检查蒸馏水桶的位置,低于放置仪器的台面,压力不够,加不上水;检查蒸馏水桶进气、进液管是否接错,接错桶内会产生气泡并发出声响;检查排水阀,应呈关闭状态。
5、 凯氏定氮仪蒸锅不加热,不能产生蒸气,为什么?
答:如果机器能正常加碱,不能加热出蒸气,判定加热丝可能烧坏了,可拿万用表量一下加热丝正负极,不通可确定加热丝损坏,换新加热丝。
如果机器不能正常加碱,开机后又没有任何声音,判断是保险丝烧断了,保险管位置在机器内部靠近电源开关接口5公分处黑色壳子内。
6、 凯氏定氮仪工作时声音大,是否正常?
答:属于正常现象,这是机器内部气泵工作的声音。
7、 凯氏定氮仪工作中不能加碱、加碱没有声音,为什么?
答:检查碱桶是否漏气,被气充鼓机器才能正常工作;仪器使用时间过长,碱管内部会产生结晶,导致加液时流速降低,没有声音。
8、 定氮仪在工作时,从顶部冒出类似烟的气体,怎么回事?
答:检查冷却水进水的水龙头是否打开,冷却水关闭或者水量小都会导致消化管出来的蒸气不能被冷凝,从机器里冒出来的水蒸气,看起来类似烟。
9、 定氮仪使用中发现消化管进满水,怎么解决?
答:定氮仪使用中发生消化管进满水,是由于机器控制水位器导电性降低造成的,解决办法:打开水位器取出探针用砂纸打磨,去掉氧化层;在蒸馏水桶里加入3-5克实验室用氯化钠,摇匀溶解。
10、定氮仪使用中发生蒸馏器、水位器进满水,硼酸吸收液容器中进水,怎么解决?
答:是机器控制水位器导电性降低造成的,解决办法:打开水位器取出探针用砂纸打磨,去掉氧化层;在蒸馏水桶里加入3-5克实验室用氯化钠,摇匀溶解。
11、定氮仪使用中消化管中白色管子发生倒吸,怎样解决?
答: 仪器停止工作(蒸馏器停止加热),气阀未能及时关闭,会产生倒吸现象,可在白色管子上扎一些小孔。气阀损坏,不能关闭,也会倒吸。
12、定氮仪工作中隔3-5秒钟会发出声响,是否正常?
答:这种声响属于正常现象,仪器工作状态下,蒸馏器会不断加热产生水蒸汽而消耗水,仪器会自动打开水阀进行补水,声响就是水阀打开、关闭的声音,属于正常现象。
13、自动工作状态不能继续工作,突然停止?
这是由于周围有电场对计算机产生干扰,按复位键或关机后再重新开机就可以。
14、测定值不稳定或过高?
可能是蒸汽发生器不干净,将蒸汽发生器内的水排空,换新水后再作测定。或者是消煮管内液体过多,有碱液冲到蒸馏系统中,这时可以空蒸蒸馏系统后再作测定。
注意事项
1、每次使用仪器前,应让仪器空煮一次,清洗仪器的内部管路。
2、仪器使用完毕,应将其中一只桶的桶盖打开,将桶内的气体排出,延长附件的使用寿命(3个或2个桶串联,排气时只打开一只桶盖即可)。
“定氮仪”的采购相关
凯氏定氮仪的重要指标是什么?是怎样的技术保证这些指标的?
1.测量范围:0.1-200mg氮(加热功率1500w,冷凝管的)
2.回收率≥99.5%
①封闭性:定氮仪采用自主研发的耐腐管路。
② 冷却效果:采用冷凝管。如果冷凝效果不理想, 氨气会逃逸)
③功率:800-1500W(目前高的功率的加热功率为750-1500保证了高低含氮量样品的回收率)
3.蒸馏器补水是否有(采用双液位控制(双保险),消除干烧之虞 )
目前市场上定氮仪普遍存在的问题及解决
1. 定氮仪整体机壳从外到里锈迹斑斑。(定氮仪的使用环境决定-----强酸、强碱、高温高压。 定氮仪的外壳整体采用汽车或飞机内饰用的高性能ABS材料,生锈。)
2. 定氮仪碱泵容易坏。(定氮仪采用恒压式加碱,即使得碱液量添加,又解决了碱 泵腐蚀的问题,还要解决碱泵颗粒堵塞问题)
3. 市场上的定氮仪蒸馏液倒吸现象时有发生。(定氮仪所有管路压力平衡,杜绝蒸馏液倒吸现象)
4.高含氮量的样品做不准确(采用国内的定氮仪)。

欧莱博-自动凯氏定氮仪

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